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土壤脲酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書（可見分光光度法）

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存； 

試劑三：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四 A 液：液體 2mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四 B 液：液體 8mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A液倒入 B 液中混合，待用；未用完的液體 4℃保存一周。

試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支， 1mg/mL 氮標(biāo)準(zhǔn)液

產(chǎn)品說(shuō)明：

S-UE 能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。

本法以尿素為基質(zhì)，利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N，生成的藍(lán)色靛酚和氨的濃度成正比。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 630nm，蒸餾水調(diào)零
1、培養(yǎng)

2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸餾水）若吸光值仍大于 1.5 繼續(xù)稀釋。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。
4、測(cè)氨量

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（y）和吸光度（x,減去濃度為 0 的空白管），做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

脲酶活力的計(jì)算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA（x）帶入公式計(jì)算測(cè)定中樣品的濃度（μg/mL）y 值。

單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

脲酶活力（U/g 土樣）＝y(tǒng)×10×V 反總÷W÷T=80×y

10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：2mL；W：樣本質(zhì)量，0.25g。