產(chǎn)品名稱:血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣,100管/96樣
產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-255,LE-2-255
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號(hào)
產(chǎn)品名稱
檢測(cè)方法
規(guī)格
售價(jià)(元)
LE-1-255
血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒
分光光度法
50管/48樣
200
LE-2-255
血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒
微量法
100管/96樣
390
血清總鐵結(jié)合力(TIBC)試劑盒說明書(分光光度法)
測(cè)定意義
血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。
測(cè)定原理
Fe2+與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,剩余未結(jié)合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時(shí)吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進(jìn)一步被還原成Fe2+,此時(shí)吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2減A1與TIBC濃度呈正比。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。(臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合)
試劑四:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。
測(cè)定操作表
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
血清(μL) |
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100 |
試劑一(μL) |
800 |
|
試劑二(μL) |
100 |
100 |
混勻,37℃,10min |
||
試劑三(μL) |
100 |
100 |
混勻,37℃,5min,對(duì)照管調(diào)零,1mL玻璃比色皿測(cè)定562nm處吸光值A(chǔ)1,測(cè)完后立即加入 試劑四 |
||
試劑四(μL) |
300 |
300 |
混勻,37℃,5min,1mL玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測(cè)定562nm 處吸光值A(chǔ)2。ΔA=A2-A1 |
血清總鐵結(jié)合力計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981
總鐵結(jié)合能力定義:37℃條件下,每升血清結(jié)合 Fe3+的μmol數(shù)。
總鐵結(jié)合能力 TIBC(μmol/L)=(△A-0.0281)÷0.5478×V 反總÷V 樣= 23.731×(A-0.0281)
V 反總:反應(yīng)總體積,1.3mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.1mL
注意事項(xiàng)
1. 吸光值大于0.8,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑二、試劑三有一定的毒性,操作時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)措施。
3. 檢測(cè)限為 4.78μmol/L。
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