產(chǎn)品名稱:硫代葡萄糖苷測(cè)試盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號(hào):SPT-2-W,SPT-1-W
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號(hào)
產(chǎn)品名稱
檢測(cè)方法
規(guī)格
售價(jià)(元)
SPT-2-W
硫代葡萄糖苷含量測(cè)試盒
可見分光光度法
50管/24樣
950
SPT-1-W
硫代葡萄糖苷含量測(cè)試盒
微量法
100管/48樣
1700
硫代葡萄糖苷(Glucosinolates)試劑盒說明書(可見分光光度法)
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
硫代葡萄糖苷(Glucosinolates),簡(jiǎn)稱硫苷,是十字花科蔬菜中的一種重要的次生代謝產(chǎn)物, 根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)的不同,可以把硫苷分為脂肪族、芳香族和吲哚族三大類。
測(cè)定原理
硫葡糖苷酶催化硫代葡萄糖苷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸, 并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化 4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物, 在 505 nm 有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存,臨用前加入 1.5mL 試劑二溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 20mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑四:液體 20mL×1 瓶,4℃避光保存。
樣本處理
樣本烘干粉碎,過 100 目篩。稱 0.1g 樣本,加入 1mL 蒸餾水,100℃水浴提取 60min。冷卻至室溫,10000g 4℃離心 10min,取上清待測(cè)。
測(cè)定操作
在 EP 管中加入如下試劑
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
樣品(μL) |
250 |
250 |
試劑一(μL) |
|
50 |
試劑二(μL) |
50 |
|
充分混勻,37℃反應(yīng) 120min |
||
試劑三(μL) |
350 |
350 |
試劑四(μL) |
350 |
350 |
充分混勻,37℃反應(yīng) 30min,吸取反應(yīng)液至 1mL 玻璃比色皿,測(cè)定 505nm 處吸光 值,記為A 對(duì)照和A 測(cè)定,△A=A 測(cè)定-A 對(duì)照。 |
計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.869x + 0.0043,R2 = 0.9999;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度:μmol/mL;y 為吸光度△A。硫代葡萄糖苷含量(μmol/g 鮮重)=(△A -0.0043)÷ 0.9345×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W )
=0.535×(△A -0.0043)÷ W
V 樣,加入樣本上清體積,0.250mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g。
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