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產(chǎn)品名稱:半纖維素含量測(cè)試盒

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣,100管/96樣

產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-101,LE-2-101

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

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貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

售價(jià)(元)

LE-1-101

半纖維素含量測(cè)試盒

分光光度法

50/48

500

LE-2-101

半纖維素含量測(cè)試盒

微量法

100管/96

950

半纖維素含量試劑盒說(shuō)明書(分光光度法)

貨號(hào)LE-1-101

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑五:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品:葡萄糖10mg×1支,4℃保存,含 10mg 無(wú)水葡萄糖(干燥失重<0.2%),臨用前加入 1mL蒸餾水溶解備用,4℃可保存1 周,或者用飽和苯甲酸溶液溶解,可保存更長(zhǎng)時(shí)間。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至 1.0、0.5、0.25、0.15、0.1、0mg/mL。

產(chǎn)品說(shuō)明:

半纖維素是植物細(xì)胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物,是構(gòu)成細(xì)胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。

半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖,與 DNS 生成紅棕色物質(zhì),在 540nm 有特征吸收峰,吸光值大小反映了半纖維素含量。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:

樣品處理:天平、40 目篩、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、烘箱、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿。

樣品處理

樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過(guò) 40 目篩。

測(cè)定操作表

 

空白管

測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

樣本(g)

 

0.1

 

試劑一(μL)

2000

90℃,10min,25℃,5000g 離心 10min

蒸餾水(μL)

 

1000

充分混勻 5000g 離心 5min,此步驟重復(fù) 3 次,取沉淀 105℃,烘干至恒重

試劑二(μL)

1000

1000

90℃,1h,自然冷卻

試劑三(μL)

100

100

試劑四(μL)

1000

1000

若未變?yōu)榈t色,接續(xù)加少量試劑四至淡紅色,25℃,5000g 離心

10min,取上清

上清(μL)

200

200

 

標(biāo)準(zhǔn)品(μL)

 

 

200

試劑五(μL)

150

150

150

蒸餾水(μL)

650

650

650

充分混勻,90℃,5min,自然冷卻

1mL 玻璃比色皿中,測(cè)定 540nm 處吸光值 A。分別記為 A 空白管, A 測(cè)定管和A 標(biāo)準(zhǔn)管,?A=A 測(cè)定管-A 空白管

半纖維素含量計(jì)算:

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度和吸光度A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 標(biāo)準(zhǔn)管0mg/mL))建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,x 為吸光值,y 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL)。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中半纖維素的含量,即將ΔAA 測(cè)定管-A 空白管)帶入 x 計(jì)算出 y 值。

半纖維素含量(mg/g 干重)= y×V1÷W×T= 2.1×y÷W×T

V1: 裂解反應(yīng)總體積,2.1mL;W:樣品質(zhì)量,g;T:上清液稀釋倍數(shù);

注意事項(xiàng)

1、檢測(cè)限為 9.8mg/g。

2、若樣本OD值大于最大標(biāo)準(zhǔn)品OD值,需將上清液用蒸餾水稀釋后顯色,計(jì)算時(shí)需乘于稀釋倍數(shù)。


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