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產(chǎn)品名稱:土壤堿性木聚糖酶測試盒/土壤堿性半纖維素酶試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣

產(chǎn)品貨號:LE-1-054,LE-2-054

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貨號

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

售價(元)

LE-1-054

土壤堿性木聚糖酶測試盒/土壤堿性半纖維素酶測試盒

可見分光光度法

50/24

410

LE-2-054

土壤堿性木聚糖酶測試盒/土壤堿性半纖維素酶測試盒

微量法

100管/48

750

壤堿性木聚糖酶(Soil Basic Xylanase S-BAX)測定試劑盒說明書(可見分光光度法

測定意義

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素 酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及 β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進 有效物質的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進營養(yǎng)物質的吸收利用,因而廣泛的應 用于釀造和飼料工業(yè)中,BAX 一般分離自最適生長 pH 為 9 -11 的微生物。

測定原理

BAX 在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進一步與 3,5-二 硝基水楊酸發(fā)生顯色反應,在 540nm 處有特征吸收峰,反應液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還 原糖量成正比,通過測定反應液在 540nm 吸光值增加速率,可計算 BAX 活力。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿。

試劑組成和配制

緩沖液:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣品處理

新鮮土樣風干,過 30-50 目篩。

測定操作表

 

對照管

測定管

土樣(g)

0.1

0.1

緩沖液 (μL)

600

400

試劑一 (μL)

 

200

混勻,50℃震蕩反應 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃離心 10min,取上清 500μL

試劑二 (μL)

500

500

混勻,90℃水浴中顯色 5min,1mL 璃比色皿測定 540nm 處吸光值 A,分別記為 A 對照管、 A 測定管,△A=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。

S-BAX 計算公式

標準曲線:y = 2.8432x - 0.0293 R2  = 0.9985

酶活定義:50℃, pH9.0 條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-BAX活力 mol/d/g  土樣)= (△A +0.0293)÷2.8432×V反總×103÷W÷T÷150 

= 67.53×(△A +0.0293)÷W

V反總:反應總體積,0.6mL;T:反應時間,1/48d;1000 1mmol/L =103μmol/L;150:木 糖分子量。

注意事項

1、保證震蕩反應 30min ,使酶與底物充分接觸。

2、注意 90℃水浴防止爆開,以免改變反應體系。


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