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1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

操作步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 290nm，蒸餾水調(diào)零。

2、XOD 檢測(cè)工作液的配制：用時(shí)在每瓶試劑二中加入 15mL 試劑一，充分混勻，待用；用不完的試劑 4℃可保存一周；

3、測(cè)定前將 XOD 檢測(cè)工作液 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃（其它物種）水浴 10min。

4、取 1mLXOD 檢測(cè)工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35μL 樣本，混勻，室溫下立即測(cè)定 290nm下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2，計(jì)算 ΔA＝A2-A1。

XOD 活性計(jì)算：

1、血清（漿）XOD 計(jì)算：

單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 尿酸定義為一個(gè)酶活力單位。

XOD（nmol/min/mL）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×10 9 ]÷V 樣÷T=2424×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 XOD 計(jì)算：

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 尿酸定義為一個(gè)酶活力單位。

XOD（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×10⁹]÷(V 樣×Cpr)÷T

=2424×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 尿酸定義為一個(gè)酶活力單位。

XOD（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×10⁹]÷（W×V樣÷V樣總）÷T

=2424×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每一萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 尿酸定義為一個(gè)酶活力單位。

XOD（nmol/min/10⁴cell）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×10⁹]÷（500×V 樣÷V 樣總）÷T

=4.848×ΔA

V 反總：反應(yīng)體系總體積，1.035×10 ^-3 L；ε：尿酸摩爾消光系數(shù)，1.22×10⁴ L/ mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.05 mL；V 樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，1 min；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬(wàn)。