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中性蛋白酶活性檢測試劑盒規(guī)范操作

中性蛋白酶是由枯草芽孢桿菌經(jīng)發(fā)酵提取而得的,屬于一種內(nèi)切酶,可用于各種蛋白質(zhì)水解處理。在一定溫度、PH值下,本品能將大分子蛋白質(zhì)水解為氨基酸等產(chǎn)物??蓮V泛應(yīng)用于動植物蛋白的水解,制取生產(chǎn)高級調(diào)味品和食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑的HAP和HVP,此外還可用于皮革脫毛、軟化、羊毛絲綢脫膠等加工。

 

產(chǎn)品說明:

NP 在一定的溫度和中性 pH 條件下,催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無毒、水解能力強(qiáng)、作用范

圍廣等特點(diǎn),中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營養(yǎng)保健品生產(chǎn)。

中性條件下,NP 催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成

鎢藍(lán);在 680nm 有特征吸收峰

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加 10 mL 蒸餾水溶解。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 10 mL 提取液,沸水浴中磁力攪拌溶解。

試劑三:液體 50mL×1 瓶, 4℃保存。

試劑四:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,0.25 μ mol/mL 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液,4℃保存。

 

操作步驟:

一、粗酶液提?。?/span>

稱約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心 10min,取上清,即粗酶

液,置冰上待測?;蛑苯臃Q取 0.1g 酶制品,加入 1mL 提取液,置冰上待測。

二、測定:

1.分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長到 680 nm,蒸餾水調(diào)零。

2.試劑一、試劑二和試劑三置于 30℃水浴保溫 30min 以上。 

 

注意:若反應(yīng)較弱,(測定管-對照管)差值較小,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間(20-30min),即第一步水浴時(shí)間,最后計(jì)算酶活時(shí)對公式進(jìn)行修改。

 

使用范圍:

● 動植物蛋白水解粉(HAP、HVP)生產(chǎn)的應(yīng)用
利用中性蛋白酶的酶促反應(yīng),可把動植物的大分子蛋白質(zhì)水解成小分子肽或氨基酸,以利于蛋白質(zhì)的有效吸收和利用,其水解液AN%高,水解度高,風(fēng)味佳,已廣泛用于生產(chǎn)高級調(diào)味品和食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑,各種動物來源性抽提物生產(chǎn)功能性骨、肉提取物(骨素)、水產(chǎn)提取物、蛋白胨、肽等及研究開發(fā)一些高附加值的功能食品。
● 焙烤行業(yè)的應(yīng)用:
中性蛋白酶可將面團(tuán)的蛋白質(zhì)水解成胨、肽類甚至氨基酸,從而減弱面團(tuán)筋力,使它具有良好的可塑性和延伸性,保持清晰美觀的印花圖案。改善成品的光澤、使餅干斷面層次分明,結(jié)構(gòu)均勻一致,口感松爽酥脆。
● 大豆分離蛋白的應(yīng)用:
能水解大豆分離蛋白成小分子肽,大大提高了大豆分離蛋白的生物效價(jià),使其易為人體消化吸收,同時(shí)還提高了溶解,降低了粘度,改善了大豆分離蛋白的功能特性。
● 酵母抽提物、酵母浸膏的生產(chǎn)應(yīng)用
提高最終產(chǎn)品的蛋白質(zhì)利用率及風(fēng)味

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