產(chǎn)品名稱:氨基酸(AA)含量測試盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣,100管/96樣
產(chǎn)品貨號:LE-1-196,LE-2-196
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
售價(元) |
LE-1-196 |
氨基酸(AA)含量測試盒 |
分光光度法 |
50管/48樣 |
80 |
LE-2-196 |
氨基酸(AA)含量測試盒 |
微量法 |
100管/96樣 |
150 |
貨號:LE-1-196
正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入 4 mL 無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入 56mL 蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 5mL 蒸餾水,充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 瓶,10mg 半胱氨酸,4℃避光保存。臨用前加入 8.26mL 蒸餾水,得到 10μmol/mL的半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品說明:
動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,在570nm有特征吸收峰;通過測定570nm吸光度,來計(jì)算氨基酸含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
臺式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、無水乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/strong>
a. 組織樣本:稱取約 0.1g 組織,加試劑一 1mL,室溫下充分研磨,轉(zhuǎn)移到 1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取 15 min;自來水冷卻后,10000rpm,4℃離心 10min,取上清液,待測。
b. 細(xì)菌或細(xì)胞樣本:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 試劑一,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);10000rpm, 4℃離心 10min,取上清液,待測。
二、測定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 570nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 操作表:
試劑名稱(μL) |
測定管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
空白管 |
樣本 |
50 |
— |
— |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
— |
50 |
— |
蒸餾水 |
— |
— |
50 |
試劑二 |
500 |
500 |
500 |
試劑三 |
500 |
500 |
500 |
試劑四 |
50 |
50 |
50 |
混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫 15 min,冷卻后反復(fù)顛倒 EP 管數(shù)次,將測定管 8000rpm 離心 5min 后取上清,于 570nm 測定吸光值。顯色后務(wù)必在 30min 內(nèi)測完。
氨基酸含量計(jì)算:
(1) 按樣本鮮重計(jì)算3. 脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)在 570nm 處無吸收峰,因此,570nm 處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
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