伊人久久大香线焦|久久青青草国产第一页|亚洲国产九九九热视频|超乳视频爆乳无码免费专区|欧美日韩亚洲视频一区二区|少妇高潮惨叫喷水在线观看|亚洲区欧美区偷拍区中文字幕|国产日韩一区二区三区在线观看

歡迎來合肥萊爾生物科技有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!銷售熱線:0551-66107970 15375214453
為更好查詢產(chǎn)品,請搜索中英文簡稱,如丙二醛(MDA)試劑盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
聯(lián)系我們Contact us
公司名稱:合肥萊爾生物科技有限公司
聯(lián)系人:陳經(jīng)理
固話:0551-66107970
手機:15375214453
地址:安徽省合肥市蜀山區(qū)經(jīng)濟開發(fā)區(qū)湖光路自主創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)基地三期(南區(qū))B座

產(chǎn)品名稱:谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣

產(chǎn)品貨號:LE-1-194,LE-2-194

產(chǎn)品報價:

免費咨詢:0551-66107970

發(fā)郵件給我們:737388448@qq.com

分享到:

 

貨號

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

售價(元)

LE-1-194

谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒

分光光度法

50/24

280

LE-2-194

谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒

微量法

100管/48

550

谷氨酰胺合成酶(GS)試劑盒說明書(分光光度法)

貨號:LE-1-194

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷 氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。

測定原理:

GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨酰基 異羥肟酸,在酸性條件下形成的絡(luò)合物在 540nm 處有最大吸收峰,可用分光光度計測定。

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:30mL ×1 瓶,4℃保存。

試劑一:12mL ×1 瓶,-20℃保存。臨用前 37℃預(yù)熱 20min,充分混勻,如有沉淀,靜置 10min,取上清待用。 

試劑二:12mL ×1 瓶,-20℃保存。臨用前 37℃預(yù)熱 20min,充分混勻,如有沉淀,靜置 10min,取上清待用。 

試劑三:粉劑 ×2 瓶,-20℃保存。用時每瓶加入 5ml 蒸餾水充分溶解待用。

試劑四15mL ×1 瓶,4℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計 、水浴鍋  臺式離心機 、可調(diào)式移液器 、 1 ml 玻璃比色皿 、研缽 、冰和蒸餾水。

樣本測定的準(zhǔn)備:

1細(xì)菌 、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量( 104 ):

提取液體積(ml)為 500~ 1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或 細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰 上待測。

組織:按照組織質(zhì)量( g) :提取液體積(ml)為 1 5~ 10 的比例(建議稱取約 0. 1g 組織,加入 1ml 提 取液) ,進(jìn)行冰浴勻漿 。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 EP 管中加入下列試劑:

試劑名稱  ( μl)

測定管

對照管

試劑一

400

 

試劑二

 

400

試劑三

175

175

樣本

175

175

混勻,37℃(哺乳動物)或 25℃(其他物種)準(zhǔn)確水浴 30min

試劑四

250

250

混勻,25℃室溫靜置 10min 后,5000g,25℃離心 10min,取上清液測定 540nm 處的吸光值 A?!鰽=A 測定管-A 對照管 。每個測定管需設(shè)一個對照管。

GS 活力單位的計算:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.8348x + 0.0008,R2 = 0.9999

1血清(漿)GS 活性

單位定義:每 ml 血清(漿)在每ml 反應(yīng)體系中每小時產(chǎn)生 1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個酶活力單位。

GS ( μmol/h/ml)=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V 反總÷V 樣÷T

= 10.268×ΔA

2 、組織 、細(xì)菌或細(xì)胞 GS 活性

1按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白在每ml 反應(yīng)體系中每小時產(chǎn)生 1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個酶活力單位。

GS ( μmol/h/mg prot)=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T

= 10.268×ΔA÷Cpr

2按樣本鮮重計算:

單位的定義:每 g 組織在每ml 反應(yīng)體系中每小時產(chǎn)生 1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個酶活力單位。

GS ( μmol/h/g 鮮重)=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷T

= 10.268×ΔA÷W

3按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

單位定義:每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每ml 反應(yīng)體系中每小時產(chǎn)生 1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個酶活力單位。

GS ( μmol/h/104 cell)=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T 

=0.021×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.75ml; V 樣:加入樣本體積,0. 175ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml; T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。


 相關(guān)新聞:
全國統(tǒng)一客服電話:

0551-66107970

地址:安徽省合肥市蜀山區(qū)經(jīng)濟開發(fā)區(qū)湖光路自主創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)基地三期(南區(qū))B座
聯(lián)系人:陳經(jīng)理
手機號碼:15375214453
固定電話:0551-66107970
公司網(wǎng)址:www.ymbasz.com

版權(quán)所有 © 合肥萊爾生物科技有限公司  皖I(lǐng)CP備17006278號-2

在線客服
在線客服
用心服務(wù) 成就你我