產(chǎn)品名稱：總糖含量測試盒
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣,100管/96樣
產(chǎn)品貨號：LE-1-096,LE-2-096
產(chǎn)品報價：
免費咨詢：0551-66107970
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
售價（元） |
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LE-1-096 |
總糖含量測試盒 |
分光光度法 |
50管/48樣 |
280 |
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LE-2-096 |
總糖含量測試盒 |
微量法 |
100管/96樣 |
500 |
總糖含量試劑盒說明書(分光光度法)
貨號：LE-1-096
正式測定前請選擇 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)?？偺且?nbsp;可稱為碳水化合物，包括可溶性的單糖，二糖以及不溶性的淀粉，纖維素，幾丁質(zhì)等。
測定原理：
總糖酸水解為還原糖，在 NaOH 和丙三醇存在下，DNS 試劑與還原糖共熱后被還原成氨基 化合物，在過量的 NaOH 堿性溶液中呈桔紅色，在 540nm 處有最大吸收峰，以此測定樣品中的總糖含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、沸水浴、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 50mL×1 瓶 ，4℃保存；
試劑三：液體 5mL×1 瓶 ，4℃避光保存；
樣品中總糖的提?。?/span>
1、組織：稱取約 0.1g 樣品，加入 1mL 試劑一，1.5mL 蒸餾水，勻漿，95℃水浴中加熱 30min， 加入 1mL 試劑二，混勻，用蒸餾水定容至 10mL ，8000g 25℃離心 10min，取上清液待測。 （注意稀釋，見注意事項）
2、液體樣本：取 0.1mL 樣本，加入 1mL 試劑一，1.5mL 蒸餾水，勻漿，95℃水浴中加熱 30min，加入 1mL 試劑二，8000g 25℃離心 10min，取上清液待測。（注意稀釋，見注意事項）
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至 95 度。
3、加樣表：
試劑( μL）
空白管
測定管
樣本
40
蒸餾水
80
40
試劑三
60
60
蒸餾水
860
860
混勻，540nm 測定吸光值，ΔA=A 測定管-A 空白管
注意：
1、空白管只要做一管。
2、如果 ΔA 大于 2，需要將上清液用蒸餾水稀釋，計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
總糖含量計算：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y = 0.4503x - 0.0507；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算：
總糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷（W×V1÷V2）×稀釋倍數(shù)=22.207×(ΔA +0.0507) ÷W×稀釋倍數(shù)。
3、按樣本蛋白濃度計算：
總糖（mg /mg prot）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷(V1×Cpr) ×稀釋倍數(shù)=2.2207×(ΔA+ 0.0507) ÷Cpr×稀釋倍數(shù)。
4、按照液體體積計算：
總糖（mg /mL）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷ [V3×V1÷(V2+V3）]×稀釋倍數(shù)=79.95×(ΔA +0.0507)×稀釋倍數(shù)。
V1：加入樣本體積，0.04mL；V2：加入提取液體積，10mL/3.5mL； V3:液體樣本，0.1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
注意：最低檢測限為 1mg/g 鮮重或 10ng/mg prot
混勻，置 95 度水浴中 10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫
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