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土壤β-葡萄糖苷酶（S-β-GC）活性檢測(cè)試劑盒說明書（可見分光光度法）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

S-β-GC 能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。

S-β-GC 能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，產(chǎn)物略顯黃色，在 400nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 10mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存；

試劑三：液體 40mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：液體 80mL×1 瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，5mmol/L 的對(duì)硝基苯酚溶液

標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備：

取 100μL 標(biāo)準(zhǔn)液，加入到 400μL 試劑三中，得到 1mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)液，十倍稀釋到 100 μmol/L， 用蒸餾水倍比稀釋：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做標(biāo)準(zhǔn)液。

操作步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 400nm,蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表：

標(biāo)準(zhǔn)曲線建立：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（y）和吸光度ΔA（A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管，x），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

S-β-GC 活力的計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA（x）帶入公式計(jì)算樣品濃度（μmol/L）。

單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μmol 對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

S-β-GC 活力（U/g  土樣）＝y(tǒng)×V 反總÷W÷T=0.444×y

T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：9.25×10-4L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。