產(chǎn)品名稱:土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號:LE-1-020,LE-2-020
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
售價(元) |
LE-1-020 |
土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)測試盒 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
500 |
LE-2-020 |
土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)測試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
980 |
土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)試劑盒說明書(可見分光光度法)
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。 (臨用前加10mL蒸餾水充分溶解)
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。 (使用前50℃加熱溶解)
試劑五:液體25mL×1瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng),它的活性反 映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。
亞硝酸還原酶可將NO2- 還原為NO ,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2- 減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。
測定操作:
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空白管 |
對照管 |
測定管 |
無底物管 |
風(fēng)干土樣(g) |
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0.1 |
0.1 |
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蒸餾水(μL) |
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200 |
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200 |
試劑一(μL) |
200 |
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200 |
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試劑二(μL) |
200 |
200 |
200 |
200 |
混勻后,25℃反應(yīng)1h |
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試劑三(μL) |
200 |
200 |
200 |
200 |
充分震蕩30s ,1000rpm ,4℃ ,離心10min |
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上清液(μL) |
500 |
500 |
500 |
500 |
試劑四(μL) |
500 |
500 |
500 |
500 |
試劑五(μL) |
500 |
500 |
500 |
500 |
充分混勻,室溫靜置顯色 10min ,用蒸餾水調(diào)零,于 1mL 玻璃比色皿中測定 540nm 各管吸光值(參照注意事項(xiàng)二) ,分別記為 A 空白管、A 對照管、A 測定管、A 無底物管。 A 空白管和A 無底物管只需各做一管。 |
酶活單位定義: 每g土樣每24h還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。
S-NiR(μmol /d/g干重) =底物消耗量( μmol)÷W÷T
=C標(biāo)準(zhǔn)×[(A空白管-A 無底物管)-(A測定管-A對照管)]÷(A空白管-A無底物管)×V加樣÷W÷T C標(biāo)準(zhǔn): 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為72.5μmol /ml;
V加樣: 反應(yīng)體系加入樣本的體積,0.2mL;T:反應(yīng)時間, 1h=1/24d; W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
1、配制好的試劑二需 3天內(nèi)使用完。
2、若吸光值超過2 ,將上清液用蒸餾水(無亞硝酸鹽污染) 進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尯笤偌尤牍ぷ饕猴@色, 并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
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