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產(chǎn)品名稱:土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣

產(chǎn)品貨號:LE-1-020,LE-2-020

產(chǎn)品報(bào)價:

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貨號

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

售價(元)

LE-1-020

土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)測試盒

可見分光光度法

50/24

500

LE-2-020

土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)測試盒

微量法

100/48

980

土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)試劑盒說明書(可見分光光度法

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑二粉劑×1瓶,4℃保存。 (臨用前加10mL蒸餾水充分溶解)

試劑三液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑四液體25mL×1瓶,4℃避光保存。 (使用前50℃加熱溶解)

試劑五液體25mL×1瓶,4℃保存。

產(chǎn)品說明:

土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng),它的活性反 映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。

亞硝酸還原酶可將NO2- 還原為NO ,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2- 減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。

測定操作:

 

空白管

對照管

測定管

無底物管

風(fēng)干土樣(g

 

0.1

0.1

 

蒸餾水(μL

 

200

 

200

試劑一(μL

200

 

200

 

試劑二(μL

200

200

200

200

混勻后,25℃反應(yīng)1h

試劑三(μL

200

200

200

200

充分震蕩30s ,1000rpm ,4 ,離心10min

上清液(μL

500

500

500

500

試劑四(μL

500

500

500

500

試劑五(μL

500

500

500

500

充分混勻,室溫靜置顯色 10min ,用蒸餾水調(diào)零,于 1mL 玻璃比色皿中測定 540nm 各管吸光值(參照注意事項(xiàng)二 ,分別記為 A 空白管、A 對照管、A 測定管、A 無底物管。

A 空白管和A 無底物管只需各做一管。

酶活單位定義: g土樣每24h還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。

S-NiRμmol /d/g干重) =底物消耗量( μmol÷W÷T

=C標(biāo)準(zhǔn)×[(A空白管-A 無底物管)-(A測定管-A對照管)]÷(A空白管-A無底物管)×V加樣÷W÷T   C標(biāo)準(zhǔn): 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為72.5μmol /ml;

V加樣: 反應(yīng)體系加入樣本的體積,0.2mL;T:反應(yīng)時間, 1h=1/24d; W:樣本質(zhì)量,g。

注意事項(xiàng):

1、配制好的試劑二需 3天內(nèi)使用完。

2、若吸光值超過2 ,將上清液用蒸餾水(無亞硝酸鹽污染) 進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尯笤偌尤牍ぷ饕猴@色, 并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。


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