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血鉀濃度檢測試劑盒說明書(微量法)

測定意義：

鉀保持機體的正常滲透壓及酸堿平衡，參與糖及蛋白代謝，保證神經(jīng)肌肉的正常功能。血清鉀高于5.5mmol/L時稱高血鉀，高血鉀可使神經(jīng)、肌肉應(yīng)激性增高，使心肌應(yīng)激性降低，導(dǎo)致心動過緩，血清鉀超過10毫摩爾/升時，可發(fā)生心室纖顫，甚至心臟在舒張期停跳。血清鉀低于3.5mmol/L時稱低血鉀，低血鉀可引起肌無力甚至肌肉弛緩性麻痹，引起心肌應(yīng)激性增高，出現(xiàn)心動過速、心律紊亂甚至在收縮期停跳。因此，血清鉀是常用的生化測定指標(biāo)。

測定原理：

血清中鉀離子與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的四苯硼鉀，產(chǎn)生的濁度在一定范圍內(nèi)與鉀離子濃度成正比。通過測定其濁度來測定測定血清鉀含量。

自備儀器和用品：

離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。

液體一：液體×1 管，4℃保存。

試劑二：粉劑×1 管，4℃保存。臨用前配制，取液體一，全部加入到試劑二瓶中，混勻。

試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1 瓶，0.5 mmol/L 鉀標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

血鉀濃度測定操作：

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長到520nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于25℃水浴中預(yù)熱30min。

3. 血清預(yù)處理：取 EP 管，依次加入50μL血清，450μL試劑一，充分混勻后室溫（25℃左右），8000rpm，離心10min，取上清液，待測。

4. 空白管：微量石英比色皿/96 孔板，依次加入40μL蒸餾水，20μL試劑二，混勻后靜置5min，再加入 140μL試劑三，混勻后于520nm測定吸光度，記為A空白管。

5. 標(biāo)準(zhǔn)管：微量石英比色皿/96孔板，依次加入40μL標(biāo)準(zhǔn)液，20μL試劑二，混勻后靜置5min，再加入140μL試劑三，混勻后于520nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

6. 測定管：微量石英比色皿/96孔板，依次加入40μL上清液，20μL試劑二，混勻后靜置5min，再加入140μL試劑三，混勻后于520nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

血鉀濃度計算公式：

血鉀濃度（mmol/dL）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×樣品稀釋倍數(shù)×V 樣總=0.5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液：0.5 mmol/L；樣品稀釋倍數(shù)：(50μL 血清+450μL 試劑一)÷50μL 血清=10；V 樣總：樣品總體積：1dL=0.1L。

注意事項：

1. 采血后宜盡早進(jìn)行血清鉀測定，時間過長會影響血清鉀含量。

2. 最低檢出限為 0.1mmol/L。